2016医学微生物学冲刺重点:志贺菌属
志贺菌属:是人类细菌性痢疾的病原菌,俗称痢疾杆菌,人类是其主要宿主,灵长类动物也是其天然宿主。下面是本站小编分享的一些相关资料,供大家参考。
一、生物学性状
①G-的短小杆菌,无芽胞,无鞭毛,无芽胞,有菌毛,营养要求不高
②分解葡萄糖,产酸不产气,除宋内志贺菌个别迟缓发酵乳糖(一般3~4天)外,均不发酵乳糖。在S.S等选择培养基上呈无③色半透明菌落。
④动力阴性,引起肠道疾病的无动力细菌。
⑤志贺菌有O和K两种抗原,O抗原是分类依据,借以将4群和40余血清型(包括亚型)。
A群——痢疾志贺菌(10)
B群——福氏志贺菌(13)→我国最常见
C群——鲍氏志贺菌(18)
D群——宋内志贺菌(1)
二、致病性和免疫性
㈠致病物质:包括侵袭力和内毒素,有的.尚能产生外毒素。
㈡所致疾病:
①志贺菌引起细菌性痢疾。我国常见的主要是福氏志贺菌(B群)和宋内志贺菌(D群)。
②传染源是病人和带菌者。传播途径主要通过粪—口途径。
③志贺菌传染几乎只限于肠道,一般不侵入血液。
④志贺菌感染有急性和慢性两种,典型的急性细菌性痢疾经过1~3天潜伏期后突然发病,常有发热、腹痛、水样腹泻,约一天左右,腹泻次数增多,并有水样腹泻转变为脓血黏液便,伴有里急后重,下腹疼痛等。
④急性中毒性痢疾常见于小儿,常无明显消化道症状而表现为全身中毒症状。急性细菌性痢疾与10%~20%的病人可转变为慢性。
㈢免疫性:抗感染免疫主要是消化道粘膜表面的分泌性IgA,病后免疫期短暂。
三、微生物检测
标本采集
尽可能在发病早期及治疗前采集新鲜粪便,选择脓血便或粘液便,必要时可用肛拭子采集。
检验方法及鉴定
生化鉴定
检查麦康凯琼脂平板,志贺氏菌的菌落为浅粉红色,半透明,将此可疑菌落接种于下列培养基中:葡萄糖肉汤,TSI琼脂斜面,赖氨酸脱羧酶肉汤,动力试验琼脂和胰胨。置35℃培养48h,但应在20h进行检查,弃去所有有动力、产H2S、产气、赖氨酸脱羧以及发酵蔗糖与乳糖的培养物。关于产生吲哚者,应弃去其44℃增菌物中的阳性培养物。至于42℃增菌培养中的所有可疑培养物皆有可能是阳性或是阴性,因此皆应予保留[1] 。
血清凝集法
志贺氏菌有 K和O抗原而无H抗原。K抗原是自患者新分离的某些菌株的菌体表面抗原,不耐热,加热100℃1小时被破坏。K抗原在血清学分型上无意义,但可阻止O抗原与相应抗血清的凝集反应。根据志贺氏菌抗原构造的不同,可分为四群48个血清型(包括亚型)。
(1)A群:又称痢疾志贺氏菌(nteriae),通称志贺氏痢疾杆菌。不发酵甘露醇。有12个血清型,其中8型又分为三个亚型。
(2)B群:又称福氏志贺氏菌(neri),通称福氏痢疾杆菌。发酵甘露醇。有15个血清型(含亚型及变种),抗原构造复杂,有群抗原和型抗原。根据型抗原的不同,分为6型,又根据群抗原的不同将型分为亚型;X、Y变种没有特异性抗原,仅有不同的群抗原。
(3)C群:又称鲍氏志贺氏菌(ii),通称鲍氏痢疾杆菌。发酵甘露醇,有18个血清型,各型间无交叉反应。
(4)D群:又称宋内氏志贺氏菌(ei),通称宋内氏痢疾杆菌。发酵甘露醇,并迟缓发酵乳糖,一般需要3~4天。只有一个血清型。有两个变异相,即Ⅰ相和Ⅱ相;Ⅰ相为S型,Ⅱ相为R型。
分离培养
取粪便(粘液或脓血部分)或肛拭标本接种GN肉汤增菌,增菌后进行分离培养。一般同时接种强弱选择性不同的两个平板。强选择鉴别培养基可用沙门、志贺菌选择培养基(SS);若选择诊断血清可选择天津生物芯片福氏志贺式多价诊断血清可疑菌落进行鉴定。
鉴定
挑选可疑菌落3~4个先用志贺菌属多价诊断血清作试探性玻片凝集试验。将试探性凝集试验阳性的菌落至少接种2~3支KIA和MIU,经35 ℃培养18~24h,凡符合;KIA:K/A、产气-/+、H2S-;MIU:动力-、吲哚+/-、尿酶-,并结合试探性玻片凝集试验阳性结果可鉴定为志贺菌属。
核酸扩增法
核酸扩增技术,即聚合酶链式反应(polymerase chainreaction,PCR),其基本原理是设计、合成两条寡核苷酸,作为引物,对应于待测病原微生物某一段特异性序列的两端,然后在体外模拟DNA体内复制的过程反复扩增,使靶序列放大上万倍甚至上百万倍而被检测出来。
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