口腔执业助理医师考点:基因工程基本原理
基因工程(genetic engineering)又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。基因工程技术为基因的结构和功能的研究提供了有力的手段。下面YJBYS小编就来具体说说基因工程基本原理吧。
基因工程根基事理一个完整的基因克隆过程应搜罗目的基因的获取,克隆基因载体的选择与刷新,目的基因与载体的'毗连,重组DNA分子导入受体细胞,筛选出含感乐趣基因的重组DNA转化细胞。实现上述过程需要一些主要的工具酶,如限制性内切核酸酶毗连酶等。限制性内切核酸酶是一类识别DNA特意序列的内切核酸酶。
①目的基因的获取外源基因又称目的基因,来历于几种路子化学合成、酶促合成cDNA,制备的基因组DNA及PCR手艺。细菌质粒、噬菌体和一些病毒DNA均可被刷新成基因克隆的载体。
②基因载体的选择与构建可作为基因载体的DNA分子有质粒DNA、噬菌体DNA和病毒DNA,它们经恰当刷新后仍具有自我复制能力,或兼有表达外源基因的能力。
③外源基因与载体的毗连毗连体例有黏性结尾毗连、平端毗连和人工接头毗连等。
④重组DNA导入宿主细胞外源DNA与载体在体外毗连成重组DNA分子,需将其导入宿主细胞。随受体细胞发展、增殖,重组DNA分子得以复制、扩增。
⑤重组体的筛选剖断哪一菌落或嗜菌斑所含重组DNA分子确实带有目的基因,即可获得目的基因的克隆,这一过程即为筛选或选择。
⑥克隆基因的表达在原核或真核表达系统中进行表达,获得所需要的卵白质。
例题(单选)在分子生物学规模中,分子克隆主若是指
的年夜量复制 的年夜量剪切 的年夜量复制 的年夜量剪切 E.反转录酶
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